刘策 等 | 黄瓜ms-3基因启动子的克隆与功能验证
2026-03-20

摘要:雄性不育是雄配子发育异常导致雄花败育的现象,在作物杂交制种过程中具有重要应用价值。课题组 前期发现了黄瓜雄性不育突变株,已定位其候选基因Csa3M006660,命名为ms-3。为研究ms-3启动子驱动ms-3基因表达的功能,本研究对黄瓜ms-3基因上游3000bp启动子序列进行生物信息学分析,构建pCAMBIA1301-proms-3表达载体并侵染烟草和GUS组织化学染色.为确定启动子的具体位置,构建了-1 500、-1002、-501、-282 bp共4种5′截短启动子片段的表达载体并进行启动子活性验证.研究结果表明,ms-3启动子序列的-196、-1353、-621、 -1941、-2696 bp等位置均发现了启动子元件,且-621 bp处的启动子强度较高.GUS染色结果表明,烟草的叶片和茎部可以被染成蓝色,推测该启动子可能具有组织特异性.5′截短启动子片段验证结果表明,-1 002 bp片段的启动效率最高,其次是-1 500、-1 953和-501 bp的片段,-282 bp片段基本不能启动,推断ms-3基因上游-501至 -1 bp内为核心启动子序列,-1 002 bp至-501 bp序列为增强子序列。以上研究结果为黄瓜ms-3基因启动子活性以及ms-3不育基因的调控机制研究奠定基础。 

关键词:黄瓜; ms-3; 启动子; 雄性不育; GUS染色

(原载于《南开学报(自然科学版)》2026年第1期)

原文阅读